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體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗
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  • 2025-04-16

一、體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗

結(jié)構(gòu)畸變：在細胞分裂的中期相階段，用顯微鏡檢出的染色體結(jié)構(gòu)改變，表現(xiàn)為缺失、斷片、互換等，可分為染色體型畸變和染色單體型畸變。

有絲分裂指數(shù)：中期相細胞數(shù)與所觀察的細胞總數(shù)之比值，是反映細胞增殖程度的指標。



二、試驗原理

在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下，使培養(yǎng)的哺乳動物細胞暴露于受試物中。用中 期分裂相阻斷劑（如秋水仙素或秋水仙胺）處理，使細胞停止在中期分裂相，隨后收獲細胞，

制片，染色，分析染色體畸變。



三、受試物要求

固體受試物需溶解或懸浮于溶劑中。

液體受試物可直接加入試驗系統(tǒng)和/或用前稀釋至適合濃度。



四、測試方法

1.使用已建立的細胞株，如中國地鼠卵巢（CHO）細胞株或中國地鼠肺（CHL）細胞株。

2.設(shè)陽性對照物、陰性對照物和至少 3 個可供分析的受試物濃度組。

3.試驗前一天：細胞放CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。

4.試驗時：加入受試物、S9 mix、培養(yǎng)液處理。

5.結(jié)束后：加入含10%胎牛血清的培養(yǎng)液處理，于24h內(nèi)收獲細胞。

6.空氣干燥或火焰干燥法制片常規(guī)制片處理，用姬姆薩染液染色。

7.對染色體畸變細胞率用X 2檢驗，以評價受試物的致突變性。

①陽性結(jié)果表明受試物引起培養(yǎng)的哺乳動物體細胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。

②陰性結(jié)果表明在本試驗條件下，受試物不引起培養(yǎng)的哺乳動物體細胞染色體結(jié)構(gòu)畸變。



五、周期

檢測項目

測試周期（工作日）

體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗

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